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分光光度計(jì)及使用維護(hù)中的注意事項(xiàng)
一、分光光度計(jì)檢定(試驗(yàn))主要項(xiàng)目對(duì)分析結(jié)果的影響
1. 波長(zhǎng)精度
分光光度法的原理要求照射在樣品池上的單色光必須與樣品吸收光譜波長(zhǎng)中的某個(gè)吸收峰相對(duì)應(yīng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值存在一定的誤差。樣品中大部分主要吸收峰都有一定的寬度,波長(zhǎng)精度要求允許更寬。但是,當(dāng)吸收峰的寬度較小,吸收峰兩側(cè)的邊緣比較陡峭時(shí),必須注意波長(zhǎng)精度的影響。
2、透光率(吸光度)精度
顯然,透射率或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信度就越差,從而影響測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
3、雜散光
雜散光是由于光學(xué)元件的制造誤差和光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射而形成的。雜散光是分析樣品的未吸收光。隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,會(huì)給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在短波紫外區(qū),光源強(qiáng)度和探測(cè)器靈敏度明顯減弱,雜散光的影響不容忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的重要指標(biāo)。
2、正確使用和維護(hù)分光光度計(jì)的幾個(gè)注意事項(xiàng)(使用儀器前必須仔細(xì)閱讀其使用說明書)
1、如果大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需要稍等片刻,等待燈管熱平衡,重新校準(zhǔn)“0"和“100%"點(diǎn)。然后再次測(cè)量。
2、指針式儀表不接電源時(shí),電表指針必須在零刻度上。如果不是這種情況,則需要進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3、比色皿使用后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布擦去水痕,以免損壞表面光潔度,影響比色皿的透光率。如果有污垢,可用稀鹽酸清洗,再用1:1的酒精和yi醚清洗晾干。請(qǐng)勿用硬物接觸或擦拭透明表面。
4、操作者不要輕易移動(dòng)燈泡和反光燈,以免影響光效。
5、由于它們的光電接收器件是光電倍增管,其自身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,所以可用于檢測(cè)微弱的光電信號(hào),但不能用于檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易出現(xiàn)信號(hào)漂移,靈敏度下降。鑒于上述特點(diǎn),維修和使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不要讓光電倍增管。升壓管長(zhǎng)時(shí)間暴露在光線下,因此預(yù)熱時(shí)應(yīng)打開比色皿蓋或使用遮光棒,以免長(zhǎng)時(shí)間暴露導(dǎo)致其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)定。
6. 放大器靈敏度偏移后,必須將其復(fù)位為零。
7.比色皿的兼容性。比色皿必須組合使用,否則測(cè)試結(jié)果將毫無意義。每次測(cè)試前都應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;將相同溶液分別注入兩個(gè)待測(cè)杯中,將儀器置于一定波長(zhǎng),石英比色皿; 220nm, 700nm 蒸餾水, 玻璃比色皿: 700nm 蒸餾水, 將一個(gè)細(xì)胞的透光率值調(diào)整到100%, 測(cè)量其他細(xì)胞的透光率值, 并記錄指示的差異和光的方向。如果透光率差異在±0.5%以內(nèi),可以一起使用。如果超過此范圍,應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
8. 堅(jiān)持使用現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)溶液,不要使用過期的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
9、防止儀器振動(dòng),影響光學(xué)系統(tǒng)。
10、在通電狀態(tài)下,不測(cè)量時(shí),應(yīng)打開樣品池門,否則會(huì)影響光電傳感器的壽命。
11、樣品集中測(cè)量,避免了多次啟動(dòng),可延長(zhǎng)光源壽命。
12、當(dāng)儀器穩(wěn)定性差,漂移大時(shí),應(yīng)考慮更換光源或光電元件。